Аннотация: В обзоре показаны особенности структуры глиадинов, а также распределение эпитопов, связанных с целиакией, среди глиадинов разных типов. Рассмотрено несколько приоритетных подходов, позволяющих ускорить создание сортов пшеницы с улучшенным составом глютена (клейковины), безопасного для здоровья.
Ключевые слова: пшеница; глютен (клейковина); структура глиадинов; эпитопы целиакии.
Благодарности: Работа поддержана бюджетным проектом № 0259-2021-0012.
Для цитирования: Виниченко Н.А., Салина Е.А. Глиадины: структура и токсичные эпитопы. Письма в Вавиловский журнал генетики и селекции. 2021;7(4):163-171. DOI 10.18699/LettersVJ2021-7-21

Аннотация: Анализ экспрессии гена Q, контролирующего основные признаки, по которым человек вел отбор у пшениц (род Triticum L.) в процессе доместикации и селекции, показал, что формирование морфологии колоса возделываемых видов пшениц действительно зависит от уровня экспрессии этого гена. На основании результатов работы установлено, что кроме нарушения в позиции 329 Q белка на его функцию и морфологию колоса пшениц также оказывают влияние другие факторы и гены.
Ключевые слова: пшеница; доместикация; ломкоколосость.
Благодарности: Считаем своим приятным долгом поблагодарить проф. H. Tsujimoto (Университет г. Тоттори, Япония) за предоставление изогенных линий сорта Chinese Spring. Работа по изучению экспрессии генов поддержана бюджетным проектом ИЦиГ СО РАН № 0324-2019-0039-С-01, в части изучения селекционного материала (линии 16H1598 и 16H1534) работа финансировалась по программе Министерства сельского хозяйства РК (BR10765056).
Для цитирования: Головнина К.А., Блинов А.Г., Майоров В.И., Ватанабе Н., Гончаров Н.П. Анализ экспрессии гена Q, контролирующего ряд важных признаков пшениц, включенных в процесс доместикации и селекции. Письма в Вавиловский журнал генетики и селекции. 2021;7(4):172-175. DOI 10.18699/LettersVJ2021-7-22

Аннотация: Современные методы трансгенеза позволяют проводить сложные модификации геномов животных для различных задач. В биотехнологии создают трансгенных животных с модификациями молока, в том числе с улучшенными антибактериальными свойствами, измененным липидным составом или новыми вкусовыми качествами. Одним из перспективных направлений в этой области можно назвать оверэкспрессию β-галактозидаз – ферментов, разлагающих лактозу, – для удаления лактозы из молока сельскохозяйственных животных. В нашей работе мы исследуем подход с экспрессией трансгалактазилирующего фермента молочнокислой бактерии Lactobacillus delbrueckii. В теории синтез этого фермента в молочной железе мыши должен приводить к исчезновению в молоке лактозы благодаря ее конверсии в галактоолигосахариды. Мы создали две трансгенные линии животных для тестирования этой гипотезы. На первом этапе протестировали различные варианты генетических конструкций, включая сигналы локализации в аппарат Гольджи, и выбрали два варианта гена β-галактозидазы под конститутивным и казеиновым промоторами для получения трансгенных линий мышей методом пронуклеарной микроинъекции. Для каждой из конструкций было получено по четыре трансгенных фаундера. Мы провели предварительный анализ характеристик трансгенных линий (копийность трансгена, экспрессия, наследование трансгена) и собрали молоко от лактирующих самок для дальнейших исследований.
Ключевые слова: трансгенез; молоко; лактоза; галактоолигосахариды; аппарат Гольджи.
Благодарности: Работа выполнена при финансовой поддержке РФФИ в рамках реализации проекта № 20-316-80001. Авторы выражают благодарность ЦКП микроскопии анализа биологических объектов ИЦиГ СО РАН.
Для цитирования: Смирнов А.В., Кораблев А.Н., Юнусова А.М., Шнайдер Т.А., Серова И.А. Получение трансгенных линий мышей для изучения возможности конверсии лактозы в галактоолигосахариды в молочной железе . Письма в Вавиловский журнал генетики и селекции. 2021;7(4):176-193. DOI 10.18699/LettersVJ2021-7-23

Аннотация: Проведены клонирование и анализ свойств целлюлазы Penicillium sp. ‘occitanis’. Ген был обнаружен в геномных данных базы NCBI. Получена плазмида pPZL-4xBGLU-Pocc, несущая четыре копии конструкции, экспрессирующей ген целлюлазы P. sp. ‘occitanis’. Плазмида была клонирована в штамм дрожжей Komagataella phaffii T07 под контроль промотора и терминатора гена AOX1. Было клонировано четыре копии экспрессирующей конструкции. В результате получен штамм K. phaffii T07 BGLU-4xPocc. Максимальный уровень экспрессии этого штамма составил ~4 000 000 Ед/л культуральной жидкости при культивировании в 5-литровом биореакторе. Полученный белок, согласно данным гель-электрофореза, дает полосу ~39.5 кДа, что соответствует расчетной массе, и обширную область примерно от 42 до 70 кДa. Формирование этой области говорит о возможном гликозилировании белка при экспрессии в K. phaffii. Анализ свойств фермента показал, что температурный оптимум активности составляет 55–65 °С, рН оптимум – примерно 1.5–2. Фермент сохраняет 50 % активности при pH от 1.5 до 6 и от 30 до 80 °С. Он стабилен при температуре ниже 75 °С в течение 4 ч, но при 85 °С за 4 ч теряет 50 % активности. Фермент устойчив при рН от 4 до 7.5.
Ключевые слова: целлюлаза; карбогидраза; эндо-β-1,4-глюканаза (EC 3.2.1.4); Penicillium sp. ‘occitanis’; Pichia pastoris; Komagataella phaffii; биотехнология; культивирование.
Благодарности: Работа выполнена при финансовой поддержке Министерства науки и высшего образования Российской Федерации в рамках реализации комплексного проекта по созданию высокотехнологичного производства по теме: «Создание высокотехнологичного производства высококачественных растительных пищевых белков» (Соглашение о предоставлении из федерального бюджета субсидии на развитие кооперации государственного научного учреждения и организации реального сектора экономики в целях реализации комплексного проекта по созданию высокотехнологичного производства № 075-11-2020-036 от 15.12.2020) в рамках Постановления Правительства РФ от 9 апреля 2010 г. № 218 на базе ИЦиГ СО РАН. Авторы выражают благодарность ЦКП протеомного и метаболомного профилирования микроорганизмов, финансируемому из средств проекта № 0259-2021-0010.
Для цитирования: Розанов А.С., Воскобоев М.E., Богачева Н.В., Коржук А.В., Шляхтун В.Н., Мещерякова И.А., Романцев В.А., Бочков Д.В., Задорожный А.B., Пельтек С.Е. Клонирование и экспрессия гена целлюлазы Penicillium sp. ‘occitanis’ в Komagataella phaffii T07, выделение и анализ свойств. Письма в Вавиловский журнал генетики и селекции. 2021;7(4):194-200. DOI 10.18699/LettersVJ2021-7-24

Для цитирования: Глазко В.И. Научная компонента селекции (по вопросам, поднятым в спецвыпуске «Вавиловского журнала генетики и селекции», 2021, Т. 25, № 4). Письма в Вавиловский журнал генетики и селекции. 2021;7(4):201-205. DOI 10.18699/LettersVJ2021-7-25